蓝莓（Vaccinium corymbosum）属杜鹃花科，越橘属植物。起源于北美，多年生灌木小浆果果树。因果实呈蓝色，故称为蓝莓国际粮农组织将其列为人类五大健康食品之一。

本试验以蓝莓半木质化茎段为外植体，并通过瓶外生根技术，建立起植株再生体系。

1 材料与方法

1.1 外植体材料及培养条件

1.1.1 外植体选择

高灌蓝莓半木质化茎段。

1.1.2 外植体预处理及灭菌

剪取蓝莓半木质化枝条，立即去掉上部叶片带回室内，剪成带有一个叶芽2-3厘米长茎段，在流动自来水中冲洗20-30分钟，在超净工作台上用75%酒精消毒2-3分钟，用无菌水冲洗3次，吸干水后在0.1%升汞中消毒5-8分钟，用无菌水冲洗3次，吸干水分，剪去茎段两端约0.5-1厘米，立即接种到初代培养基中。

1.1.3 培养条件

诱导培养基：改良WPM   ZT 1.0mg/L

增殖培养基：改良WPM   IAA 0.1mg/L   ZT 2.0mg/L

复壮培养基：改良WPM   IBA 0.1mg/L

WPM具体改良为：以硝酸钙 684mg/L、硝酸钾 190mg/L、EDTA铁钠 73.4mg/L和盐酸硫胺素0.1mg/L代替原WPM培养基中的硫酸钾、氯化钙、硫酸亚铁和乙二胺四乙酸钠。

以上培养基均加蔗糖3%，琼脂0.7%，pH值5.2。

培养温度为25℃，光照强度为2000lx，光照时长为12-16时/天。

2 结果与分析

2.1 初代诱导培养

将处理好的外植体立即接种到诱导培养基中，5-6天叶芽开始萌动，10天开始展叶，20天腋芽长到1厘米长，30天腋芽长到1.5-2.5厘米长。

2.2 继代增殖培养

将初代培养长出的茎剪成1.5-2厘米长茎段转接到增殖培养基中。30-35天增殖5-7倍，增殖苗生长健壮。

2.3 复壮培养

将继代苗剪成1-1.5厘米茎段，转接到壮苗培养基，复壮培养30-40天，复壮苗高5-6厘米且粗壮。

2.4 瓶外生根培养

2.4.1 苗床准备

苔藓经过挑选，剔除粗硬部分，将细柔苔藓在500倍多菌灵溶液中浸泡10-15小时。捞出后稍沥干水分，铺到事先准备好的苗床上，压平压实，苔藓厚度5-7厘米。

2.4.2 扦插

在温室中将瓶中复壮苗取出，在800倍多菌灵中洗净基部附着的培养基，剪成2厘米左右茎段，再置于100mg/L IBA生根剂溶液中并立即捞出，用镊子扦插到准备好的苔藓苗床中，株行距2.5-3厘米。扦插后立即扣小拱棚保湿。

前1周应保持小拱棚内空气相对湿度95%以上，温度20-28℃，之后2周保持相对湿度85%-90%。20天后逐渐揭开保湿的塑料膜。40天生根成活率可达70%-80%。

生根后可每周喷施1/2倍大量元素培养液一次。90天后生根苗长到25厘米左右，粗度达0.18厘米，平均长出3个基生枝，长出大量不定根，根长最长可达30厘米。