文心兰 (Oncid ium flexuosum Lodd),又名舞女兰、瘤瓣兰,为兰科 (Orch idaceae)瘤瓣兰属 (Oncid ium Sw.)植物。原生于中南美洲的墨西哥、巴西、玻利维亚一带。因其潇洒脱俗的花姿、温文尔雅的气质、妙趣横生的形态和容易莳养的习性,深受广大消费者的喜爱,是世界重要的盆花和切花种类之一。本试验在前人工作的基础上,对文心兰的离体茎尖培养进行了试验研究。
1 材料与方法
1.1 外植体材料及培养条件
1.1.1 外植体选择
泰国引进的名贵切花品种——大花文心兰的茎尖。
1.1.2 外植体预处理及灭菌
从母株上选叶片尚未展开的幼苗,用自来水洗净泥沙,除去外层叶片,暴露侧芽。然后在超净工作台上用75%酒精消毒20s,接着用0.1%升汞消毒10分钟,用无菌水冲洗4-5次,剥取侧芽茎尖,接种到诱导培养基上。
1.1.3 培养条件
培养温度为25±2℃,光照强度1500-2000lx,光照时长10-12小时/天。
2 结果与分析
2.1 初代诱导培养
将茎尖接种到诱导培基上,15天后茎尖开始膨胀,23天后在茎尖基部出现了类似愈伤组织样的乳状突起,一个月后可陆续产生桑果状的原球茎团。
2.2 继代增殖培养
将原球茎分切接种于增殖培养基,培养30天,增值率可达300%以上。
2.3 分化培养
将不需继代的原球茎转接到分化培养基上。原球茎在长大的同时,也会发生少量增殖,25天左右原球茎开始分化出芽。
2.4 壮苗生根培养
将分化培养基上原球茎分化出的芽苗接种到壮苗生根培养基,培养45天左右,均每株有3条根,3.5片叶,根长1.5厘米,株高4.3厘米,而且植株叶色浓绿,根粗,生长健壮。
2.5 炼苗与移栽
当试管苗具3-4片叶,3-4条根时即可出瓶移栽。打开瓶盖,置于散射光下,炼苗2-3天,小苗就能逐渐适应外界环境。接着小心取出试管苗,洗净根部附着的琼脂,浸入1000倍的多菌灵溶液中20分钟,取出晾干,然后移植到水苔基质上,并按日常管理。
附配方
诱导培养基:MS 6-BA 2mg/L NAA 0.5mg/L
增殖培养基:改良KC 6-BA 1.5mg/L NAA 0.2mg/L CW 10%
分化培养基:改良KC 0.2mg/L
生根壮苗培养基:改良KC NAA 0.5mg/L 香蕉汁 10% Ac 0.2%
以上培养基均加蔗糖3% ,琼脂0.7%,pH值5.6。