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文心兰组培快繁技术实例分享

发布时间:2018-01-03 10:43   发布人:李媛   浏览次数:616

文心兰 (Oncid ium flexuosum Lodd),又名舞女兰、瘤瓣兰,为兰科 (Orch idaceae)瘤瓣兰属 (Oncid ium Sw.)植物。原生于中南美洲的墨西哥、巴西、玻利维亚一带。因其潇洒脱俗的花姿、温文尔雅的气质、妙趣横生的形态和容易莳养的习性,深受广大消费者的喜爱,是世界重要的盆花和切花种类之一。本试验在前人工作的基础上,对文心兰的离体茎尖培养进行了试验研究。

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1 材料与方法

1.1 外植体材料及培养条件

1.1.1 外植体选择

泰国引进的名贵切花品种——大花文心兰的茎尖。

1.1.2 外植体预处理及灭菌

从母株上选叶片尚未展开的幼苗,用自来水洗净泥沙,除去外层叶片,暴露侧芽。然后在超净工作台上用75%酒精消毒20s,接着用0.1%升汞消毒10分钟,用无菌水冲洗4-5次,剥取侧芽茎尖,接种到诱导培养基上。

1.1.3 培养条件

培养温度为25±2℃,光照强度1500-2000lx,光照时长10-12小时/天。

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2 结果与分析

2.1 初代诱导培养

将茎尖接种到诱导培基上,15天后茎尖开始膨胀,23天后在茎尖基部出现了类似愈伤组织样的乳状突起,一个月后可陆续产生桑果状的原球茎团。

2.2 继代增殖培养

将原球茎分切接种于增殖培养基,培养30天,增值率可达300%以上。

2.3 分化培养

将不需继代的原球茎转接到分化培养基上。原球茎在长大的同时,也会发生少量增殖,25天左右原球茎开始分化出芽。

2.4 壮苗生根培养

将分化培养基上原球茎分化出的芽苗接种到壮苗生根培养基,培养45天左右,均每株有3条根,3.5片叶,根长1.5厘米,株高4.3厘米,而且植株叶色浓绿,根粗,生长健壮。

2.5 炼苗与移栽

当试管苗具3-4片叶,3-4条根时即可出瓶移栽。打开瓶盖,置于散射光下,炼苗2-3天,小苗就能逐渐适应外界环境。接着小心取出试管苗,洗净根部附着的琼脂,浸入1000倍的多菌灵溶液中20分钟,取出晾干,然后移植到水苔基质上,并按日常管理。

附配方

诱导培养基:MS   6-BA 2mg/L   NAA 0.5mg/L

增殖培养基:改良KC   6-BA 1.5mg/L   NAA 0.2mg/L   CW 10%

分化培养基:改良KC   0.2mg/L

生根壮苗培养基:改良KC   NAA 0.5mg/L   香蕉汁 10%   Ac 0.2%

以上培养基均加蔗糖3% ,琼脂0.7%,pH值5.6。