多肉万象组培快繁技术实例分享 · 附配方
万象(Haworthia maughanii)又名毛汉十二卷,为百合科、十二卷属多年生肉质植物。万象形态非常奇特,叶半圆筒状,肉质叶肥厚,属典型的珍奇观赏多肉植物。
试验以花葶为外植体,获得再生植株,并从芽诱导、芽增殖,到诱导生根的培养,已建立起完整的无性繁殖体系,本课题万象微型繁殖技术已应用于在企业生产中。
1 材料与方法
1.1 外植体材料及培养条件
1.1.1 外植体选择
购得的万象成熟种苗在25℃环境下培养,浇少量水,待到其抽出花葶3-5厘米时切下。
1.1.2 外植体预处理及灭菌
用洗衣粉水清洗并用毛笔刷洗;在超净工作台上用75%酒精快速浸泡30秒,然后用加有两滴吐温-80的0.1%氯化汞溶液浸泡8分钟,之后用无菌水冲洗4次,每次洗2分钟。
1.1.3 培养条件
培养温度22℃-26℃之间,光照12小时/天,光照强度1500-2000lx。
2 结果与分析
2.1 初代诱导培养
在超净工作台上把花葶切断,每段0.5-1厘米,接入诱导培养基(配方见文末,下同)中,培养20天左右,会诱导出愈伤组织,培养45-60天可诱导出丛生芽。
2.2 继代增殖培养
愈伤组织形成后,会在愈伤组织上萌发丛生的不定芽。在超净台上,剥离不定芽,接种于增殖培养基,培养30-40天有新的丛生芽长出。
2.3 生根培养
将长至2厘米以上的小苗,转接至生根培养基中,转接时,切净芽基部的愈伤组织。10天开始可以看到根的发生。
2.4 炼苗与移栽
小苗根长1厘米时可以出苗,移栽前在培养室中打开瓶盖练苗3天,取出生根苗,在放有800-1000倍多菌灵溶液中清洗去基部培养基。
栽培基质用新鲜湿润的蛭石,植入后遮阴,第一次不浇水。1个星期后喷杀菌剂,浇少量水。小苗移栽成活率78%。
附配方
诱导培养基:MS KT 2mg/L NAA 0.2mg/L Ad 5mg/L
增殖培养基:MS KT 1mg/L NAA 0.1mg/L NaH2PO4 40mg/L
生根培养基:1/2MS NAA 0.2mg/L
以上培养基均加琼脂0.7%,诱导愈伤组织和芽以及芽增殖时加蔗糖3%,生根时加蔗糖2.5%。pH值5.6-5.8,其中NaH2PO4主要起促进芽的分化的作用。